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黄曲霉毒素免疫亲和柱重要操作程序明细
点击次数:564 发布时间:2019-01-15
 黄曲霉毒素免疫亲和柱系列产品包括以下特点:
采用高特异性和高亲和力的的单克隆抗体。
柱容量高,有效提高纯化效率。
达到真菌毒素检测的国内外限量标准。
良好的稳定性和可靠性,回收率达到90-95%。
 
操作程序
样品准备:
以下只是对一般样品的操作过程。具体到某些样品,可以在对操作过程进行调整。
适用样品:玉米,小麦,燕麦,黑麦和大麦,奶制品。
 
样品取样:
真菌毒素分析的误差来源是样品的收集和取样过程,所以要保证样品收集和取样具有代表性。
样品提取:
步:称取粉碎后的样品,加入提取溶液;
第二步:用高速均质机搅拌,提取;
第三步:用漏斗过滤样品溶液;
 

样品过柱纯化
称取粉碎后的样品,加入提取溶液;
1.纯化柱准备:取出黄曲霉m1免疫亲和层析柱, 恢复至室温,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上,连接储样管和收集管;
2.加样:加入10ml样品液过柱,去掉亲和柱下方堵头,调节开关,流速为1ml/min左右。
3.洗涤:液体彻底排净后,加入5ml10%甲醇水2次,流速为3ml/min左右。(如有需要,可重复洗涤几次)
4.洗脱:液体排净后,更换收集管,加入1.5-3ml甲醇,孵育2min,流速为1ml/min左右。
注:收集管中的洗脱液即为纯化后的样品,可直接用ELISA,荧光和液相等方法进行检测。
 
可重复性(CV%):
纯化后直接用于ELISA 法,液相色谱法,荧光光度法等。
稳定性:18个月
可以用于复杂样品检测,包括食品、饲料、调味品等多种复杂基质。
可用于黄曲霉毒素B1B2G1G2M1M2,呕吐毒素,伏马毒素,赭曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的检测。
 
产品功能:黄曲霉毒素免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素m1,从而对黄曲霉毒素m1样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素m1含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
 
反应原理:黄曲霉毒素免疫亲和柱的测定的基础是抗原抗体反应,黄曲霉毒素m1单克隆抗体连接在柱内凝胶上,样品中的黄曲霉毒素m1经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢的通过黄曲霉毒素B1免疫亲和层析柱,在免疫亲和柱内,毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素m1,然后注入到分析仪器中用于检测。
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